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panc02细胞(小鼠胰腺癌细胞)

发表时间:2024-06-24

细胞:panc02细胞

中文名称:小鼠胰腺癌细胞

生长特性:贴壁

培养基:DMEM-H +10%FBS(GIBCO胎牛血清)

冻存条件:50%基础培养基、40% FBS、10% DMSO

panc02细胞传代:

1):细胞密度约80%时,吸出原培养瓶中的培养基,PBS缓冲液润洗细胞两次,加2~3 ml 0.25% yi酶进行消化细胞(注意根据实际情况,把握消化时间)。

2):镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时;

(可用吸管吸起些许yi酶轻轻吹打细胞层某处,即可肉眼可见细胞层脱落,或吹打后镜下观察吹打处,即消化完成,否则继续消化)

直接吸掉yi酶,加3~4ml 培养基,轻轻吹打细胞层,把细胞层吹落,吹散。

3):取部分细胞悬液转移到新的培养皿中,添加适当的培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养。

4):注意培养基PH值变化情况,定期换液(每周2-3次),待细胞密度达到80%以后重复1项操作或者冻存。

收到细胞后请尽快更换配套培养基,或自己配置的新鲜培养基(含15%血清),如因特殊情况需要继续使用原瓶培养基,请在原瓶培养基中额外添加10%的血清(原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过72小时)。


(网络信息主针对网络推广作用,仅供参考,细胞培养请咨询细胞库管理员,以细胞库管理员提供给您的信息为准,操作前,如果有不明白之处,先咨询细胞库管理员,避免不必要的损失;)

第二代iPS方法,其中已经有一些表现出了更好的安全性。逆转录病毒的可重复性和简便性,使其依然活跃在体外研究中。然而在再生医学领域,附加体型载体(episomal plasmid)更受青睐。

(人SW579细胞 来源:通派细胞库 人甲状腺鳞癌细胞)(人H292细胞 来源:通派细胞库 人肺癌细胞)

其他方法还包括腺病毒、仙台病毒、合成蛋白和RNA。不过,这些方法尽管更为安全,但技术要求比较高,对重编程效率也并无改善。研究显示,仅通过小分子就可完成细胞重编程。这意味着,间接靶标与多能性有关的分子通路,就足以重新决定细胞的命运。

(鼠CHO-K1细胞 来源:通派细胞库 仓鼠卵巢细胞)(人ZR-75-1细胞 来源:通派细胞库 人乳癌细胞)

理解上述分子通路,可以帮助人们防止已进入多能状态的细胞回到已分化状态。多能细胞和已分化细胞之间,存在DNA甲基化和组蛋白乙酰化的差异。另外,靶标表观遗传学机制的小分子,能够提升重编程效率。总的来说,在提升重编程效率的工作中需要特别注意表观遗传学因子的改变。

(小鼠MC3T3-E1 Subclone 14细胞 来源:通派细胞库 小鼠颅顶前骨细胞亚克隆细胞)

将多能性的iPSC分化成为人们想要的细胞类型,必须对许多因子加以控制。有些iPSC克 隆在分化时存在一定的偏好。对于医学应用来说,也许不将细胞逆转得会更好。

(小鼠3T3-L1细胞 来源:通派细胞库 小鼠胚胎成纤维细胞)(大鼠SHZ-88细胞 来源:通派细胞库 大鼠乳癌细胞)

实际上,研究者们已经在没有到达多能性状态的情况下,成功将体细胞 重编程(有时甚至只用到了一个外源转录因子)。值得注意的是,这些被称为直接重编程的技术,需要的基因组改变要少于传统的 iPS技术,在模拟疾病方面很有潜力。