hTERT-HPNE细胞 人胰腺导管上皮细胞

细胞：hTERT-HPNE细胞

中文名称：人胰腺导管上皮细胞

生长特性：贴壁细胞

培养基：1640 培养基  血清：10%FBS

冻存条件：50%基础培养基、40% FBS、10% DMSO

细胞常规培养传代流程（ 请严格遵照无菌操作）

1． 吸出原培养瓶中的培养基，PBS 缓冲液润洗细胞两次，加 2-3 ml 0.25% 胰_酶进行消化细胞（注意把握消化时间，通常控制在 1-2min）

2． 镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时（不建议消化到细胞漂浮）去掉胰_酶，加 6~8ml 培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散。

3． 取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养。

4． 注意培养基 PH 值变化情况，定期换液（每周 2-3 次），待细胞密度达到 80%以后重复 1 项操作或冻存。

（网络信息主针对网络推广作用，仅供参考，细胞培养请咨询细胞库管理员，以细胞库管理员提供给您的信息为准，操作前，如果有不明白之处，先咨询细胞库管理员，避免不必要的损失；）

第二代iPS方法，其中已经有一些表现出了更好的安全性。逆转录病毒的可重复性和简便性，使其依然活跃在体外研究中。然而在再生医学领域，附加体型载体(episomal plasmid)更受青睐。

（人SW579细胞 来源：通派细胞库 人甲状腺鳞癌细胞）（人H292细胞 来源：通派细胞库 人肺癌细胞）

其他方法还包括腺病毒、仙台病毒、合成蛋白和RNA。不过，这些方法尽管更为安全，但技术要求比较高，对重编程效率也并无改善。研究显示，仅通过小分子就可完成细胞重编程。这意味着，间接靶标与多能性有关的分子通路，就足以重新决定细胞的命运。

（鼠CHO-K1细胞 来源：通派细胞库 仓鼠卵巢细胞）（人ZR-75-1细胞 来源：通派细胞库 人乳癌细胞）

理解上述分子通路，可以帮助人们防止已进入多能状态的细胞回到已分化状态。多能细胞和已分化细胞之间，存在DNA甲基化和组蛋白乙酰化的差异。另外，靶标表观遗传学机制的小分子，能够提升重编程效率。总的来说，在提升重编程效率的工作中需要特别注意表观遗传学因子的改变。

（小鼠MC3T3-E1 Subclone 14细胞 来源：通派细胞库 小鼠颅顶前骨细胞亚克隆细胞）

将多能性的iPSC分化成为人们想要的细胞类型，必须对许多因子加以控制。有些iPSC克 隆在分化时存在一定的偏好。对于医学应用来说，也许不将细胞逆转得那么彻_底会更好。

（小鼠3T3-L1细胞 来源：通派细胞库 小鼠胚胎成纤维细胞）（大鼠SHZ-88细胞 来源：通派细胞库 大鼠乳癌细胞）

实际上，研究者们已经在没有完_全到达多能性状态的情况下，成功将体细胞 重编程(有时甚至只用到了一个外源转录因子)。值得注意的是，这些被称为直接重编程的技术，需要的基因组改变要少于传统的 iPS技术，在模拟疾病方面很有潜力。