RAOEC细胞（大鼠血管内皮细胞）

细胞：RAOEC细胞

中文名称：大鼠血管内皮细胞         生长特性：贴壁细胞

培养基：DMEM-L +10% FBS（GIBCO胎牛血清）      

冻存条件：50%基础培养基、40% FBS、10% DMSO

RAOEC细胞传代：

1）：细胞密度约80%时，吸出原培养瓶中的培养基，PBS缓冲液润洗细胞两次，加2~3 ml 0.25% yi酶进行消化细胞（注意根据实际情况，把握消化时间）。

2）：镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时；

（可用吸管吸起些许yi酶轻轻吹打细胞层某处，即可肉眼可见细胞层脱落，或吹打后镜下观察吹打处，即消化完成，否则继续消化）

直接吸掉yi酶，加3~4ml 培养基，轻轻吹打细胞层，把细胞层吹落，吹散。

3）：取部分细胞悬液转移到新的培养皿中，添加适当的培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养。

4）：注意培养基PH值变化情况，定期换液（每周2-3次），待细胞密度达到80%以后重复1项操作或者冻存。

收到细胞后请尽快更换配套培养基，或自己配置的新鲜培养基（含15%血清），如因特殊情况需要继续使用原瓶培养基，请在原瓶培养基中额外添加10%的血清（原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过72小时）。

（网络信息主针对网络推广作用，仅供参考，细胞培养请咨询细胞库管理员，以细胞库管理员提供给您的信息为准，操作前，如果有不明白之处，先咨询细胞库管理员，避免不必要的损失；）

通过细胞重编程的两个状态，描述了异质性产生的基础。首先，OSKM转基因激活一系列随机事件，当这些事件达到“适当”条件时，细胞转变为第二个状态。

（人H1975细胞 来源：通派细胞库 人非小细胞肺腺癌细胞）（人BT474细胞 来源：通派细胞库 人乳癌细胞）

这个状态会出现决定性的基因表达，此时转基因被沉默，细胞被重塑为多能性状态。在Buganim这个模型中，转基因激活与沉默之间的平衡，是细胞重编程效率低的重要原因。

（人REH细胞 来源：通派细胞库 人急性非B非T淋巴细胞性白血病细胞）（人WiDr细胞 来源：通派细胞库 人大肠癌细胞）

可以换一种途径进行重编程，激活或沉默非基因组的因子，将有望显著提高重编程效率。“组学”数据无疑能加深我们对这些因子的认识，帮助我们理解细胞重编程的必要条件和非必要条件。

（小鼠OP9细胞 来源：通派细胞库 小鼠颅盖成纤维细胞）（人HT29细胞 来源：通派细胞库 人结直肠腺癌细胞）

在这些信息的基础上，我们可以同步细胞动态，在引入转基因时让大多数细胞处于佳状态。已经有前期工作表明，重编程动态受到一些限速步骤的调控。

（小鼠mMSC细胞 来源：通派细胞库 小鼠骨髓间充质干细胞）（人MV522细胞 来源：通派细胞库 人肺癌细胞）

比如，去除组蛋白乙酰化的一个抑制子，可以使体外重编程的效率达到几乎100%。此外，引入OSKM也会刺激甲基化等细胞过程，以维持内稳态。对于研究这些过程的动态而言，定量技术将特别有优势。FACS和拉曼光谱才刚开始用于细胞重编程的定量研究，就已经表现出了很大的潜力。