（特别声明：以下细胞均为科研用途细胞 ，仅供科研学术用途，非临床和工业用途。）

通派细胞库细胞检测平台提供细胞增殖、细胞凋亡、细胞周期、细胞迁移等细胞学检测技术服务。

通派细胞库提供平板克隆形成和软琼脂克隆形成实验服务，可检测各种贴壁细胞和非锚着依赖生长的细胞，如骨髓造成干细胞、肿 瘤细胞株等。提供完整实验报告，实验原始数据、图片。

ST细胞株：猪胎睾丸传代细胞/ 组织来源：睾丸 /生长特性：贴壁/ST细胞培养条件：DMEM-H +10%FBS

RIN-m细胞株：褐鼠胰岛素瘤上皮细胞 /组织来源：胰岛 /生长特性：贴壁/ RIN-m细胞培养条件：1640+10%FBS

AtT-20细胞复苏/小鼠垂体 瘤细胞(AtT-20细胞)

(U-937细胞)人组织细胞淋巴 瘤细胞 U937细胞 U-937细胞实验

H1650细胞复苏/人非小细胞肺 癌细胞(H1650细胞)

(NCI-H1299细胞)人非小细胞肺 癌细胞 NCI-H1299细胞实验

普通MTT法实验步骤：

1：接种细胞：用含10%胎小牛血清得培养液配成单个细胞悬液，以每孔1000-10000个细胞接种到96孔板，每孔体积200ul.

2: 培养细胞：同一般培养条件，培养3-5天(可根据试验目的和要求决定培养时间)。

3：呈色：培养3-5天后，每孔加MTT溶液(5mg/ml用PBS配制，pH=7.4)20ul.继续孵育4 h，

终止培养，小心吸弃孔内培养上清液，对于悬浮细胞需要离心后再吸弃孔内培养上清液。每孔加150ul DMSO，振荡10min，使结晶物充分融解。

4：比色：选择490nm波长，在酶联免疫监测仪上测定各孔光吸收值，记录结果，以时间为横坐标，吸光值为纵坐标绘制细胞生长曲线。

HBMEC细胞(脑) 人脑微血 管内皮细胞HBMEC

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RPMI2650细胞株：人鼻腔上皮细胞/ 组织来源：鼻 /生长特性：贴壁/ RPMI2650细胞培养条件：1640+10%FBS

S-180细胞株：小鼠肛门纤维肉 瘤细胞 / 组织来源：肌肉 / 生长特性：贴壁/ S-180细胞培养条件：1640+10%FBS

H358细胞复苏/人非小细胞肺 癌细胞(H358细胞)、(PC3细胞)人前列 腺癌细胞 PC-3细胞 PC3细胞实验

HBMEC细胞(脑) 人脑微血 管内皮细胞HBMEC

细胞培养注意事项：

1）荧光染色法观察：用荧光染料Hoechst33258，此染料能与 DNA 特异地结合，可使支原体内的 DNA 着色，然后用荧光显微镜观察。

(12430-062高糖DMEM，液体)(11960-044高糖DMEM，液体)

2）染色方法为：用支持物盖片培养法将细胞接种在盖片上，在细胞汇合前（即未长满前）取出玻片，于碟皿中，用不含酚红的Hanks 液漂洗，1:3醋酸钾固定10分钟。

(12430-047高糖DMEM，液体)(12430-104高糖DMEM，液体)

3）再用生理盐水漂洗后置于50μg/mL的Hoechst33258(生理盐水配制)中染色10分钟，置于蒸馏水漂洗1～2分钟，向细胞面滴加数滴pH5.5磷酸缓冲液，然后置荧光显微镜下观察。

(21063-029高糖DMEM，液体)(21063-045高糖DMEM，液体)

4）若用细胞培养液，先离心去除上清液，再加入Hanks液漂洗，离心弃上清后加入1:3 醋酸甲醇固定10分钟,用生理盐水漂洗后去上清液.

(12491-015高糖DMEM，液体)(12491-023高糖DMEM，液体)

5）用Hoechst33258 染色10分钟，加入蒸馏水漂洗，离心去上清蒸馏水，加3～5滴pH5.5磷酸缓冲液，稍吹打使沉淀细胞重悬浮，用吸管吸出，滴于载物片上，盖上盖片后观察。

6）荧光显微镜下支原体呈绿色小点，散在于细胞周围或附于细胞表面。