SCC-4细胞(舌) 人舌鳞癌细胞SCC-4

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VSC4.1细胞株：脊髓前角运动神经元瘤细胞系/   组织来源： 血液 /生长特性：半悬半贴/VSC4.1细胞培养条件：L15+10%FBS

C4-2细胞株： 人前列 腺癌细胞 /组织来源：前列 腺 /生长特性：贴壁 /培养条件：1640+10%FBS

RF/6A细胞复苏/猴脉络丛视网膜内皮细胞(RF/6A细胞)

(CV-1细胞)非洲绿猴肾细胞CV1细胞 CV-1细胞实验

MRC-5细胞复苏/人胚肺细胞(MRC-5细胞)

(RF/6A细胞)猴脉络膜-视网膜(内皮)细胞RF/6A细胞实验

SCC-4细胞(舌) 人舌鳞癌细胞SCC-4

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COS-1细胞株：非洲绿猴SV40转化的肾细胞/组织来源：肾 /生长特性：贴壁 /COS-1细胞培养条件：1640+10%FBS

H929细胞株：人浆细胞白血 病细胞 /组织来源：血液 /生长特性：悬浮 /H929细胞培养条件：1640+10%FBS

RM-1细胞复苏/小鼠前列 腺癌细胞(RM-1细胞)、(VERO细胞)非洲绿猴肾细胞VERO细胞实验

U87 MG细胞复苏/人脑星形胶质母细胞(U87 MG细胞)、(MV-1-Lu细胞)水貂肺上皮细胞MV-1-Lu细胞实验

肿 瘤细胞培养：（钽网培养法）

1）：将取得的瘤组织去除脂肪、结缔组织及坏死部分，在平皿中用Hanks液洗3次，剪碎组织，切成1-2mm3小块；

2）：在一张面积约为1平方cm的钽网上放入剪碎的一块、几块肿 瘤组织块(1~2mm3大小)；

3）：用镊子轻压，使其粘于网上，再把钽网放入培养皿中，使网下的组织块与皿壁紧紧接触；

4）：于37℃ 5% CO2下培养，每隔2-3天换液一次，5天后可见有上皮细胞从网上移出，并能在相当于肿 瘤组织部位形成纯净的单层上皮细胞；

SCC-4细胞(舌) 人舌鳞癌细胞SCC-4

细胞培养注意事项：

1）荧光染色法观察：用荧光染料Hoechst33258，此染料能与 DNA 特异地结合，可使支原体内的 DNA 着色，然后用荧光显微镜观察。

(12430-062高糖DMEM，液体)(11960-044高糖DMEM，液体)

2）染色方法为：用支持物盖片培养法将细胞接种在盖片上，在细胞汇合前（即未长满前）取出玻片，于碟皿中，用不含酚红的Hanks 液漂洗，1:3醋酸钾固定10分钟。

(12430-047高糖DMEM，液体)(12430-104高糖DMEM，液体)

3）再用生理盐水漂洗后置于50μg/mL的Hoechst33258(生理盐水配制)中染色10分钟，置于蒸馏水漂洗1～2分钟，向细胞面滴加数滴pH5.5磷酸缓冲液，然后置荧光显微镜下观察。

(21063-029高糖DMEM，液体)(21063-045高糖DMEM，液体)

4）若用细胞培养液，先离心去除上清液，再加入Hanks液漂洗，离心弃上清后加入1:3 醋酸甲醇固定10分钟,用生理盐水漂洗后去上清液.

(12491-015高糖DMEM，液体)(12491-023高糖DMEM，液体)

5）用Hoechst33258 染色10分钟，加入蒸馏水漂洗，离心去上清蒸馏水，加3～5滴pH5.5磷酸缓冲液，稍吹打使沉淀细胞重悬浮，用吸管吸出，滴于载物片上，盖上盖片后观察。

6）荧光显微镜下支原体呈绿色小点，散在于细胞周围或附于细胞表面。