E0771细胞株 (小鼠乳腺细胞 E0771)

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MKN74细胞株：人胃 癌细胞 /组织来源：胃 /生长特性：贴壁/MKN74细胞培养条件：DMEM-H +10%FBS

mRTEC细胞株：小鼠肾小管上皮细胞 /组织来源：肾 /生长特性：半悬半贴 /mRTEC细胞培养条件：1640+10%FBS

HCC4006细胞培养人肺 癌腺癌细胞(HCC4006细胞系)、

（HBZY-1细胞系）大鼠肾小球系膜细胞HBZY-1细胞

LXF-289细胞培养人肺 癌腺癌细胞(LXF-289细胞系)、

（HBL-100细胞系）人整合SV40基因的乳腺上皮细胞HBL-100细胞

肿 瘤细胞培养：（酶消化法）

1）：将取得的瘤组织去除脂肪、结缔组织及坏死部分，在平皿中用Hanks液洗3次，剪碎组织，切成1-2mm3小块；

2）：在碎组织块中加入0.25%胰蛋白酶或(2000u/ml胶原酶)在37℃水浴中消化30分钟(或更长一些)；

3）：去除消化液，用洗液洗3次，培养液洗1次后，用完全培养基悬浮；用吸管吹打分散制成细胞悬液，计数；

4）：以5×108～10×108/L细胞浓度，在含有10%小牛血清的RPMI1640(或Eagle MEM或DMEM)中37℃ 5% CO2下分瓶(或皿)培养；

E0771细胞株 (小鼠乳腺细胞 E0771)

培养基、耐药株筛选、基因敲除株筛选、荧光标记、STR鉴定等，根据实际时间段的人力安排或者技术要求做评估选择所承接的实验课题；

中性红染色：常用染料之一，是细胞器的专有染料。利用细胞膜的通透性差异，用来染原生动物和显示动植物组织中活细胞的内含物等。中性红无毒，常做活体染色的染料。

NCCIT细胞株：人畸胎 癌细胞/ 组织来源：胚胎 /生长特性：贴壁/NCCIT细胞培养条件：DMEM-H +10%FBS

HCC2935细胞培养人肺 癌腺癌细胞(HCC2935细胞系)、（H4细胞系）人神经胶质 瘤细胞H4细胞

E0771细胞株 (小鼠乳腺细胞 E0771)

细胞培养注意事项：

1)：支原体污染的检测：低涨处理地衣红染色观察取已在培养瓶中的支持物盖片或培养液，用新鲜配制的0.5%枸椽酸溶液处理盖片细胞。

(Beta-TC-6细胞培养条件：80% DMEM、20%\胎牛血清\贴壁细胞\小鼠胰岛素瘤胰岛β细胞)

2）：用新配制的Carnoy液固定两次，每次10分钟，取出盖片凉干。用培养液时，先吸取1mL，500～800r/min离心5分钟后去除上清，留0.2mL，将0.5%枸椽酸溶液加入其中，置 10 分钟，加入 Carnoy 液固定，离心弃上清固定液，余 0.2mL 沉淀物，制成 2～3张涂片。

(BeWo细胞培养条件：90% F12K、10%\胎牛血清\贴壁细胞\人胎盘绒膜癌细胞)

3）：用2%醋酸依地红(地衣红2g，冰醋酸60mL，加蒸馏水至100mL)染5分钟。纯酒精过三次，每次1分钟，封入Euparal或树胶中。若染色过深，可先用75%酒精脱色，再封片。

(BGC-823细胞培养条件：90% RPMI-1640、10%\胎牛血清\贴壁细胞\人胃 癌细胞)

4)：镜下观察见支原体呈暗紫色小点，位于细胞外或细胞之间。

(BJ细胞培养条件：90% DMEM高糖、10%\胎牛血清\贴壁细胞\人皮肤成纤维细胞)