D283med人脑髓母细胞(D283med细胞 STR鉴定)

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McA-RH7777细胞株：大鼠肝 癌细胞 /组织来源：肝 /生长特性：贴壁/McA-RH7777细胞培养条件：DMEM-H +10%FBS

MIApaca-2细胞株：人胰腺 癌细胞 /组织来源：胰腺/ 生长特性：贴壁/MIApaca-2细胞培养条件：DMEM-H +10%FBS

SHP-77细胞培养人肺 癌细胞(SHP-77细胞系)

（CA46细胞系）人burkitt淋巴 瘤细胞CA46细胞

SK-MES-1细胞培养人肺 癌细胞(SK-MES-1细胞系)

（Caov-4细胞系）人卵巢 癌细胞Caov-4细胞

0.01mol/L PH7.4 磷酸盐缓冲液(PBS)配制：

甲液(0.1mol/LKH2PO4溶液)：KH2PO413.608g，加蒸馏水至1000ml。

乙液(0.1mol/L Na2HPO4溶液)：Na2HPO435.814g，加蒸馏水至1000ml。

取甲液19ml，乙液81ml NaCl8.5g、Tween-20 0.5ml混合后加蒸馏水至1000ml即可。再加入0.05%Tween-20即为ELISA试验的洗涤液。

D283med人脑髓母细胞(D283med细胞 STR鉴定)

培养基、耐药株筛选、基因敲除株筛选、荧光标记、STR鉴定等，根据实际时间段的人力安排或者技术要求做评估选择所承接的实验课题；

肝细胞传代培养：

1）：待细胞生长连接成片后，用BSS洗一二次；

（11043-023   199培养基(1X),液体）（11825-015   199培养基(1X),液体）

2）：加1：1的0.025％胰蛋白酶和0.02％ EDTA混合消化3～5分钟；

（12350-039   199培养基(1X),液体）（10370-021  MEM培养基（1X），液体）

3）：待细胞回缩，便停止消化，弃掉消化液，用BSS洗一二次，注入营养液，吹打，制成细胞悬液，再接种培养；

MN9D细胞株：小鼠中脑多巴胺能神经元细胞 /组织来源：脑 /生长特性：半悬半贴/MN9D细胞培养条件：1640+10%FBS

RERF-LC-Sq1细胞培养人肺 癌细胞(RERF-LC-Sq1细胞系)、（143TK-细胞系）人胸腺激酶缺陷型细胞143TK-细胞

D283med人脑髓母细胞(D283med细胞 STR鉴定)

细胞培养注意事项：

1)：支原体污染的检测：低涨处理地衣红染色观察取已在培养瓶中的支持物盖片或培养液，用新鲜配制的0.5%枸椽酸溶液处理盖片细胞。

(Beta-TC-6细胞培养条件：80% DMEM、20%\胎牛血清\贴壁细胞\小鼠胰岛素瘤胰岛β细胞)

2）：用新配制的Carnoy液固定两次，每次10分钟，取出盖片凉干。用培养液时，先吸取1mL，500～800r/min离心5分钟后去除上清，留0.2mL，将0.5%枸椽酸溶液加入其中，置 10 分钟，加入 Carnoy 液固定，离心弃上清固定液，余 0.2mL 沉淀物，制成 2～3张涂片。

(BeWo细胞培养条件：90% F12K、10%\胎牛血清\贴壁细胞\人胎盘绒膜癌细胞)

3）：用2%醋酸依地红(地衣红2g，冰醋酸60mL，加蒸馏水至100mL)染5分钟。纯酒精过三次，每次1分钟，封入Euparal或树胶中。若染色过深，可先用75%酒精脱色，再封片。

(BGC-823细胞培养条件：90% RPMI-1640、10%\胎牛血清\贴壁细胞\人胃 癌细胞)

4)：镜下观察见支原体呈暗紫色小点，位于细胞外或细胞之间。

(BJ细胞培养条件：90% DMEM高糖、10%\胎牛血清\贴壁细胞\人皮肤成纤维细胞)