A549细胞 人肺癌细胞

细胞：A549细胞

中文名称：人肺癌细胞

生长特性：贴壁细胞

A549细胞培养基：DMEM-H +10%FBS（GIBCO胎牛血清）

细胞检测服务：A549细胞鉴定（细胞检测技术服务可直接咨询客服 ）

1、贴壁细胞签收时，如贴壁良好密度已经较大， 镜下观察密度达到80%（或以上），请更换新鲜的完全培养基（含10%血清），在细胞培养箱孵育过夜，至第二天再进行消化传代，也可换液后在培养箱孵育稳定4-6小时后，做消化传代分瓶，不必再等到次日消化；

2、贴壁细胞签收时，如呈悬浮或者部分悬浮的状态，请将悬浮的细胞即时离心，加15%血清的完全培养基到新的培养皿/瓶继续培养3天；同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为15%血清的完全培养基，培养3天。3天后若原瓶或者新瓶中的细胞都没有出现增殖而是继续脱落死亡，请及时联系我司细胞库管理员，技术人员会跟进解决；

（网络信息主针对网络推广作用，仅供参考，细胞培养血清注意事项请咨询细胞库管理员，以细胞库管理员提供给您的信息为准，操作前，如果有不明白之处，先咨询细胞库管理员，避免不必要的损失；）动物支气管炎病毒(AIBV)核酸检测实验

实验方法：

1）：样品处理：

培养物、试子等液体标本：将标本充分混匀，取100μ液体标本加入500μl RNA提取液A（Trizol reagents）充分震荡，室温放置5min。

固体组织：取50mg左右组织用玻璃匀浆器匀浆或剪刀剪碎，加入500μl RNA提取液A（Trizol reagents），研磨或振荡至匀浆状，转移到1.5ml的EP管中，室温放置5min。

2）：加入100μl氯仿，用力震荡15s，室温静置5min，4℃ 13,000rpm离心5min。

3）：小心将上层水相转移到干净离心管中，加300 μl 无水乙醇，另加10μl RNA提取液B（内含不溶物，使用前室温溶解并充分混匀），充分混匀，13,000rpm离心1min。

4）：.弃上清，加入500μl 75%的DEPC乙醇，充分混匀，13,000rpm离心1min，小心吸去大部分乙醇。

5）：.将提取管敞口在室温空气中干燥5min待乙醇挥发干净，用20μl DEPC H2O溶解沉淀。

阴性质控品：取100μl阴性质控品加入500μl RNA提取液A（Trizol reagents）充分震荡，室温放置5min。后按1.2~1.5操作。