MDCK细胞系狗肾细胞的基本属性与培养要点
发表时间:2024-07-15MDCK细胞系,即犬肾细胞系,是由S.H.MADIN和Darby于1958年从一只雌性英国可卡犬的肾脏组织中建立而来的。
基本属性
形态:上皮细胞样,贴壁生长。
染色体数目:通常为76至80条,呈超二倍体特征。
生长特性:具有较高的病毒感染效率和增殖速度,且不易发生变异。
培养要点
培养基:推荐使用MEM(ATCC改良)或DMEM培养基,并添加10%的胎牛血清(FBS)以及青霉素-链霉素(PS)等抗生素,以确保细胞的正常生长和防止污染。
生长条件:气相为95%空气+5%二氧化碳,温度为37℃。这些条件有助于模拟细胞在体内的生长环境。
传代方法:当细胞密度达到80%-90%时,即可进行传代。传代比例通常为1:2至1:3,每周进行2-3次。传代过程中需使用胰蛋白酶和EDTA混合消化液进行细胞消化,然后按照适当的比例将细胞悬液分配到新的培养瓶中。
冻存条件:使用无血清冻存液或含有90%血清和10%DMSO的冷冻保存液进行冻存,冻存管需置于液氮中长期保存。
综上所述,MDCK细胞系具有独特的生物学特性和广泛的应用前景。在培养过程中,需要严格控制培养基的配方、生长条件和传代方法等因素,以确保细胞的正常生长和实验结果的可靠性。
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